Gen za rezistenciju na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Ime proizvoda
Komplet za otkrivanje gena rezistencije na karbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (fluorescentna PCR)
Epidemiologija
Karbapenemski antibiotici su atipični β-laktamski antibiotici s najširim antibakterijskim spektrom i najjačim antibakterijskim djelovanjem.Zbog svoje stabilnosti na β-laktamazu i niske toksičnosti, postao je jedan od najvažnijih antibakterijskih lijekova za liječenje teških bakterijskih infekcija.Karbapenemi su vrlo stabilni na β-laktamaze proširenog spektra (ESBL) posredovane plazmidom, kromosome i cefalosporinaze posredovane plazmidom (enzimi AmpC).
Kanal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Unutarnja kontrola | Unutarnja kontrola |
| CY5 | NDM | KZK |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tehnički parametri
| Skladištenje | ≤ -18 ℃ |
| Rok trajanja | 12 mjeseci |
| Vrsta uzorka | Sputum, čiste kolonije, rektalni bris |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Specifičnost | a) Komplet otkriva standardizirane negativne reference tvrtke, a rezultati zadovoljavaju zahtjeve odgovarajućih referenci. b) Rezultati testa unakrsne reaktivnosti pokazuju da ovaj komplet nema unakrsnu reakciju s drugim respiratornim patogenima, kao što su Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratorni adenovirus, Enterococcus ili uzorci koji sadrže druge gene otporne na lijekove CTX, mecA, SME, SHV, TEM itd. c) Anti-interferencija: mucin, minociklin, gentamicin, klindamicin, imipenem, cefoperazon, meropenem, ciprofloksacin hidroklorid, levofloksacin, klavulanska kiselina, roksitromicin odabrani su za ispitivanje interferencije, a rezultati pokazuju da gore navedene interferirajuće tvari nemaju interferirajuću reakciju do otkrivanja gena rezistencije na karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM i IMP. |
| Primjenjivi instrumenti | Applied Biosystems 7500 PCR sustavi u stvarnom vremenu QuantStudio®5 PCR sustavi u stvarnom vremenu SLAN-96P PCR sustavi u stvarnom vremenu (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR sustav LineGene 9600 Plus PCR sustav detekcije u stvarnom vremenu (FQD-96A，HangzhouBioer tehnologija) MA-6000 Kvantitativni termalni cikler u stvarnom vremenu (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 PCR sustav u stvarnom vremenu BioRad CFX Opus 96 PCR sustav u stvarnom vremenu |
Tijek rada
Opcija 1.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (koji se može koristiti s automatskim ekstraktorom nukleinske kiseline Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) tvrtke Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Dodajte 200 μL fiziološke otopine u precipitat talusa.Sljedeći koraci trebaju slijediti upute za ekstrakciju, a preporučeni volumen eluacije je100μL.
opcija 2.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Reagens za ekstrakciju ili pročišćavanje nukleinske kiseline (YDP302) tvrtke Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstrakciju treba započeti u strogom skladu s 2. korakom uputa za uporabu (dodajte 200 μL pufera GA u precipitat talusa , i protresite dok talus potpuno ne visi).Za eluiranje koristite vodu bez RNaze/DNaze, a preporučeni volumen eluiranja je 100 μL.
Opcija 3.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Reagens za otpuštanje uzorka makro i mikro testa.Uzorak sputuma treba isprati dodavanjem 1 mL normalne fiziološke otopine gore spomenutom tretiranom talogu talusa, centrifugirati na 13000 o/min tijekom 5 minuta, a supernatant baciti (zadržati 10-20 µL supernatanta).Za čiste kolonije i rektalne briseve dodajte 50 μL reagensa za oslobađanje uzorka izravno u gore spomenuti tretirani talus talusa, a sljedeće korake treba ekstrahirati prema uputama za uporabu.
